Căn phòng hổ phách nổi tiếng nói trên được xây dựng từ năm 1701 đến 1709. Khi đó Quốc vương nước Phổ học đòi lối sống xa xỉ của Hoàng đế Pháp Louis XIV, nên đã ra lệnh cho các kiến trúc sư và nghệ nhân nước mình tạo ra một căn phòng rộng 55m2 gồm 12 bức tường, 12 cột trụ đều được khảm hoặc dát bằng hổ phách. Thời đó, hổ phách đắt gấp 12 lần giá vàng. Tổng cộng, người ta đã dùng tới 6 tấn hổ phách, vàng và đá quý, trị giá khi ấy là hơn 500 triệu bảng, để tạo nên công trình này. Trong ngày khánh thành, 565 cây nến đã được thắp sáng làm cho Căn phòng hổ phách lấp lánh, chói lọi một màu vàng.

Năm 1716, khi kết giao đồng minh với Nga, Quốc vương nước Phổ đã quyết định tặng Căn phòng hổ phách cho Sa hoàng Pyotr Đại đế. Năm 1717, công trình này được tháo rời và chuyên chở tới Saint Petersburg. Sau Cách mạng tháng Mười, Căn phòng hổ phách được đưa vào gìn giữ, bảo quản trong Cung điện Catherine và trở thành điểm du lịch nổi tiếng của Liên Xô (cũ) khi đó.

Trong Thế chiến II, phát xít Đức tấn công vào Leningrad năm 1941 và bao vây thành phố. Khi đó những người làm việc ở Viện bảo tàng (nằm trong vùng bị quân Đức chiếm đóng) đã tìm cách bao bọc Căn phòng hổ phách bằng giấy và vải để ngụy trang. Nhưng quân Đức đã nhanh chóng phát hiện và tháo gỡ căn phòng, đóng gói vào 27 thùng lớn rồi vận chuyển về thành phố Koenigsberg ở miền Đông nước Phổ. Tháng 1/1945, Hồng quân Liên Xô (cũ) tấn công thành phố này và pháo, bom đã san bằng Koenigsberg. Kể từ đó, Căn phòng hổ phách cũng biến mất và trở thành một bí ẩn lớn.